常規的細胞增殖檢測技術
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?細胞是以分裂的方式進行增殖的。單細胞生物，以分裂的方式產生新個體。多細胞生物，以分裂的方式產生新細胞，從而補充體內衰老或死亡的細胞，有絲分裂是真核生物進行細胞分裂的主要方式。細胞增殖是生物體生長發育、繁殖遺傳的基礎，所以對細胞增殖的檢測一直是一大研究熱點。
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?常規細胞增殖檢測技術包括以下幾種：
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?（1）標志蛋白的WB檢測等。
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?PCNA（Proliferating Cell Nuclear Antigen）是增殖細胞相關的核抗原，在DNA復制以及細胞增殖的啟動中起重要作用。Ki67也是一種細胞增殖核抗原，在有絲分裂中維持DNA結構的穩定性，在細胞周期G0期無表達，G1期開始表達，S期和G2期表達量逐漸升高，M期表達量最高，有絲分裂結束后則降解消失。WB實驗可對PCNA或Ki67的表達水平進行檢測，從而間接得知細胞增殖情況。
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?優勢：簡便性，廣泛性，無組織特異性。
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?劣勢：間接反映細胞增殖的情況。
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?（2）EdU檢測
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EdU （5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中?；贓dU與熒光染料的特異性反應檢測DNA復制活性?，F多用EdU檢測替代BrdU檢測。
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優勢：體外實驗，檢測靈敏度高，可與多種抗體或熒光蛋白同時標記。
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?劣勢：具有毒性。
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?（3）CFSE檢測法
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羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）是一種熒光染料，可穿透細胞膜，進入細胞后不可逆的與細胞內的氨基結合偶聯到細胞蛋白質上，細胞分裂時，標記熒光平均分配至2個子代細胞中，熒光強度是親代細胞的一半。利用流式細胞儀的488nm激發光檢測。
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優勢：直接法，活細胞檢測。
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?劣勢：CFSE濃度太低，熒光強度不夠；濃度太高，毒性影響細胞增殖。
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?（4）CCK8檢測法。
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?CCK8檢測法是MTT檢測法的升級版。CCK8檢測試劑中含有WST-8，WST-8是一種類似于MTT的化合物，可被線粒體內的脫氫酶還原生成水溶性的甲臜。細胞增殖越多越快，顏色越深。酶聯免疫檢測儀測定450nm吸光度。
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?優勢：簡便，結果直觀，活細胞檢測。
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?劣勢：間接反映活細胞數量。CCK8試劑顏色為淡紅色，與含酚紅的培養基顏色相近，不注意的話容易漏加或多加。
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云克隆公司現推出了活性蛋白產品，活性蛋白對細胞增殖影響的檢測，我們多采用的是CCK8檢測法結合鏡檢觀察。如表皮生長因子活性蛋白（APA560Hu02），其濃度升高后，可刺激3T3細胞增殖，結果如下:
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