酶聯免疫吸附測定實驗（ELISA）實驗常見問題及解答
在酶聯免疫吸附測定實驗中，每一個步驟或環節都需要操作者嚴格控制實驗條件，否則可能會影響到最終結果?，F就試驗中遇到得常見問題進行分析總結，給進一步給出解決方案，希望能為幫助相關實驗人員提供實驗成功率。
| 問題 | 可能原因 | 解決方案 |
標準曲線差 | 標準品準備不正確 | 進行正確的標準品梯度稀釋 |
| 吸取及洗滌不充分 | 充分的吸取及洗滌 | |
| 移液不精確 | 檢查和校正移液器 | |
| 精密度低 | 洗滌不充分 | 按說明書要求充分洗滌和浸泡 |
| 混勻不充分和吸取試劑不足 | 充分混勻和吸取試劑 | |
| 重復利用吸頭、容器和覆膜 | 使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜 | |
| 加樣不精確 | 檢查和校正移液器 | |
| O.D值低 ? | 每孔加的試劑量不精確 | 校正移液器，精確加入試劑 |
| ?溫育時間不正確 | 保證充足的溫育時間 | |
| ?溫育溫度不正確 | 試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度 | |
| 酶標記物或底物失效 | 通過混合酶標記物和底物，顏色應迅速顯現來檢查 | |
| ?沒有加入終止液 | ???按照說明書實驗操作步驟加入終止液 | |
| 超出讀數時間讀數 | 在說明書推薦的讀數時間內讀數 | |
| 樣本值? | ?不正確的樣本儲存方式 | 正確儲存樣本，使用新鮮樣本進行實驗 |
| 不正確的樣本收集和處理方法 | 采取正確的樣本收集和處理方法 | |
| 待測物質在樣本中含量低 | 使用新鮮樣本，重復實驗? |