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        酶聯免疫吸附測定實驗(ELISA)實驗常見問題及解答


        在酶聯免疫吸附測定實驗中,每一個步驟或環節都需要操作者嚴格控制實驗條件,否則可能會影響到最終結果?,F就試驗中遇到得常見問題進行分析總結,給進一步給出解決方案,希望能為幫助相關實驗人員提供實驗成功率。


        問題可能原因
        解決方案

        標準曲線差

        標準品準備不正確進行正確的標準品梯度稀釋
        吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌
        移液不精確檢查和校正移液器
        精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡
        混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑
        重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜
        加樣不精確檢查和校正移液器
        O.D值低
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        每孔加的試劑量不精確校正移液器,精確加入試劑
        ?溫育時間不正確保證充足的溫育時間
        ?溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度
        酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物,顏色應迅速顯現來檢查
        ?沒有加入終止液???按照說明書實驗操作步驟加入終止液
        超出讀數時間讀數在說明書推薦的讀數時間內讀數
        樣本值??不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗
        不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法
        待測物質在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復實驗?


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