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        • IL10活性蛋白可抑制LPS刺激的THP1細胞產生IL1β

          白介素10(IL10),又被稱為細胞因子合成抑制因子(CSIF),是一種抗炎因子。IL10是一種多細胞源、多功能的細胞因子 ,調節細胞的生長與分化,參與炎性反應和免疫反應,是公認的炎癥與免疫抑制因子。據報道,IL10可以抑制細胞因子的分泌,抑制單核巨噬細胞的抗原提呈作用。實驗原理:IL10主要抑制脂多糖(LPS)介導的由巨噬細胞和Th1細胞產生的促炎細胞因子TNFα、IL1β、IL12和IFNγ的分泌。為驗證IL10活性蛋白的活性,本實驗通過LPS刺激THP1細胞產生IL1β,通過對比IL10對IL1β分泌的抑制作用,以評價IL10活性蛋白的活力。實驗過程:將......

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        • 血管緊張素轉化酶2(ACE2)活性蛋白

          云克隆推出了三大物種科研用血管緊張素轉化酶2(ACE2)活性蛋白產品,以期為助力科研盡綿薄之力。云克隆ACE2相關活性蛋白產品CatalogSpeciesProductAPB886Hu01HumanActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Mu01MouseActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Ra01RatActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APX273Ge02Pan-speciesActive Spike Protein (SP)以人血管緊張素轉化酶2,ACE2(APB886Hu01)活性蛋白為例,活性驗證方案如下:實驗原理:SARS-CoV和SARS-CoV-2的spike蛋白(SP)可通過......

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        • 什么是中和抗體,該怎么檢測?

          最近,在新冠疫情中想必大家總是聽到一個專有名詞——中和抗體,它是什么呢?和普通抗體有什么區別呢?在病毒學中,中和抗體(Nautralizing Antibody, )首先是抗體,它在抗體這個層面上和普通抗體的概念重合,是機體免疫細胞被抗原激活后,由B淋巴細胞分化的漿細胞分泌的,能與相應抗原特異性結合的免疫球蛋白。除此之外,中和抗體顯然還應該有專門針對“中和”的更進一層的含義,這里的中和是指該抗體能和病毒結合,進而阻斷病毒感染。這種阻斷能力主要通過三種方式來實現:1.阻斷病毒與細胞表面受體的結合;2.阻斷病毒侵入細胞;3.阻......

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        • 活性蛋白——IFN-γ的細胞刺激實驗

          干擾素γ(IFN-gama)是一種多功能蛋白,IFN-γ由T淋巴細胞和NK細胞產生,它既是一種高效的抗病毒生物活性物質,又是一種具有廣泛免疫調節作用的淋巴因子。IFN-γ還能活化中性粒細胞、NK細胞,刺激血管內皮細胞和白細胞合成的黏附分子,促進Th1細胞發育并抑制Th2細胞活化與增殖。實驗方案:據報道,IFNγ是人單核THP1細胞的重要激活因子。因此,我們選用THP-1細胞作為待刺激細胞,用不同濃度的IFNγ與THP1細胞在RPMI-1640培養基中共培養5天,在顯微鏡下每天觀察THP-1細胞的形態。實驗結果:A.THP1細胞在RPMI-1640培養基中以5ng/ml IFN-γ......

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        • 肽酰甘氨酸α-酰胺化單加氧酶活性實驗

          肽酰甘氨酸α-酰胺化單加氧酶(Peptidyl-glycine alpha-amidating monooxygenase, PAM)是多種多肽產生生物活性所必需的酶。它含有兩個具有催化活性的酶活性域:肽基甘氨酸α-羥基化單加氧酶(PHM)和肽基-α-羥基甘氨酸α-酰胺化裂解酶(PAL)。這些催化結構域依次作用于將神經內分泌肽催化為活性的α-酰胺化產物。通常,將Dns-Tyr-Val-Gly底物水解為Dns-Tyr-Val-NH2作為PAM的典型活性測定法。實驗方法:1.在1mL含100mM MES / KOH(pH 6.0)、30mM KI,30mM KCl,1μmol/ L硫酸銅,100ug / mL過氧化氫酶,1%(v / v)乙醇,0.001%(v /......

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        • PNGase F活性測定

          實驗原理肽-N-糖苷酶F(PNGase F),可以在N-連接糖蛋白的高甘露糖、雜合和復合寡糖部分最內側的N-乙酰葡萄糖胺和天冬酰胺殘基之間進行切割。本試驗以真核表達的重組Interferon Gamma(IFNg)蛋白為底物來測定重組肽-N-糖苷酶F的活性。實驗試劑及儀器試劑:10×變性緩沖液:5% SDS,400mM DTT反應緩沖液:50mmol/L Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40儀器:SDS-PAGE電泳儀實驗步驟將真核蛋白Interferon Gamma(IFNg)用1×變性緩沖液稀釋成1μg/μL,在100℃煮沸10min使其變性。將重組蛋白PNGase F用反應緩沖液從1000ng/mL開始進行兩倍稀......

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        • 蛋白活性實驗-SOD3活性蛋白

          實驗原理Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3),是SOD同工酶的一種。SOD3以Cu2+、Zn2+為輔基,屬于CuZn SOD,可以消除體內代謝產生的反應氧族,抵御內外環境中超氧離子的損傷。由于超氧陰離子自由基O2 - 壽命短,不穩定,不易直接測定SOD活性,而采用間接的方法。本實驗采用鄰苯三酚自氧化法來間接測定,SOD的活性。鄰苯三酚在堿性條件下能迅速自氧化,生成有色中間產物,在325nm下吸光值增加,加入SOD酶后能抑制其自氧化的速率,從而間接測定SOD酶的活性。實驗試劑及儀器試劑:50mmol/L Tris-HCl,pH8.250mmol/L 鄰苯三酚......

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        • Caspase-3活性檢測

          實驗原理Caspase-3是一種蛋白酶,屬于半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族,在細胞凋亡中起著不可替代的作用。caspase-3可以被多種因素活化,在CTL細胞的殺傷作用中,它既可被Fas/FasL途徑活化,也可以通過顆粒酶B途徑活化。顆粒酶B是CTL細胞顆粒中的一種絲氨酸酯酶,是哺乳動物中除caspase蛋白酶外唯一的在Asp后剪切的蛋白酶,它可以特異性剪切ICE家族蛋白酶催化亞單位C端的XXD序列,并活化caspase 2、3、6、7、8、9、10。Caspase-3能催化特異性底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide (Ac-DEVD-pNA)水解生成對硝基苯胺,通過......

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        色亚洲五月天
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