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蛋白活性實驗-TNF-a活性蛋白TNF-a是內源性的熱原，能夠引起發熱、凋亡細胞死亡、炎癥和抑制腫瘤發生。據報道，TNF-a可以抑制A549細胞的增殖和誘導凋亡，在刺激后細胞上清液中IL-1的濃度會增加。實驗方法：因此,A549細胞在DMEM孵化TNFa(1 ng / mL,10 ng / mL)2 h,4 h,8 h,24小時、48小時,然后細胞被倒置顯微鏡觀察,IL-1β被ELISA檢測細胞上清液中。實驗結果：用TNF-a (10ng/mL)孵育72h后觀察細胞凋亡(見圖一）。A BFigure 1. Effect of TNF-aon A549 cells.(A)A549 cells cultured in DMEM, stimulated with 10ng/mL TNF-afor 72h; (B......

蛋白活性實驗-CD14活性蛋白CD14作為一種共受體(連同toll樣受體TLR 4和MD-2)用于檢測細菌脂多糖(LPS)。CD14只能在脂多糖結合蛋白(LBP)存在的情況下結合LPS。雖然LPS被認為是其主要的配體，但CD14也能識別其他的與病原體相關的分子模式，如lipoteichoic acid。此外，脂多糖結合蛋白(LBP)已被鑒定為CD14的中間體，因此進行了ELISA結合檢測，以檢測重組人CD14和重組人LBP的相互作用?；钚詫嶒灒河煤?.01%的BSA 的PBS (PH7.4)稀釋CD14。將100μl樣本轉移到LBP預包被板中37℃孵育2 h。用抗CD14多抗孵育1小時后用PBST沖洗，，然后吹吸，沖洗3......

免疫組織化學用于觀察標本的染色結果對靶抗原抗體進行鑒定和定位，其標本制備非常重要。在制作標本過程中，需保持抗原的完整性，在染色、洗滌包埋等過程中避免發生溶解和變性，同時防止擴散至鄰近細胞或組織間隙中。組織材料的處理是獲得良好免疫組織化學結果的前提，活體組織，各種體液及穿刺液和細胞都可以用于免疫組化分析，針對不同的標本類型可以選擇不同的制備方法?；铙w組織常選用石蠟切片和冰凍切片處理，而體液、穿刺液及細胞樣本則選用涂片方式處理。對于細菌菌落或尸體病變組織，可將新鮮切面壓印于玻片上做成印片。我們......

1.烘片：60℃烘片0.5-2小時。2.脫蠟水化：烘片結束后，石蠟切片依次置于以下試劑中：1）二甲苯I：30 min2）二甲苯II：30 min3）100%乙醇：10 min4）95%乙醇：10 min5）80%乙醇：10 min6）70%乙醇：10 min7）自來水沖洗10 min3.抗原修復-微波爐抗原熱修復法（可選）：將組織切片轉移到沸騰的EDTA-Tris 溶液中使其完全浸透。低火加熱1min，停止加熱并靜置于微波爐中10min。然后再低火加熱3-4min，停止加熱，使EDTA-Tris 溶液在室溫自然冷卻。4.PBST漂洗3次：去除殘留并浸泡在PBST中，在搖床中以40 RPM漂洗5 min，重復3次。5.阻斷內源過......

1)雙擊看圖軟件“CaseViewer_2.1__RTM_v2.1.2.69595”，按照提示進行安裝；2）安裝結束后會出現三個快捷方式，均要保留（不能刪除）；3）雙擊綠色圖標"CaseViewer"快捷方式，出現一個界面，然后點擊“Local computer”；4）找到“computer”通過路徑找到目標切片，雙擊即可看見圖片，通過滾動鼠標中間的滑輪來調整圖片放大倍數，然后點擊即可截取屏幕所顯示的圖片。

酶聯免疫吸附測定實驗（ELISA)-特殊樣本處理方法之前的專題中我們給大家介紹了常規樣本諸如血清，血漿，組織細胞等的處理方法。這一次我們再跟大家普及一些在ELISA檢測中碰到特殊樣本的處理方式。v痰液選擇痰液中較為粘稠部分稱重，加兩倍于痰量的0.1%DTT(二硫蘇糖醇)37攝氏度恒溫水浴振蕩5分鐘，再加入兩倍于痰量的PBS緩沖液繼續振蕩15-20分鐘，150目的金屬絲網過濾，1,000×g離心10分鐘吸取上清液-20oC或-80oC冷凍保存。v肺泡灌洗液1,000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20oC或-80oC保存，但應避免反復......

活性人白介素6（IL6）白細胞介素6 (IL-6)是一種白細胞介素，它既是一種促炎細胞因子，又是一種抗炎的肌氨酸。目前的數據表明IL-6可通過Jak / Stat3通路直接應用于雌激素受體陽性的乳腺癌細胞增殖抑制實驗?；钚詫嶒灒罕緦嶒炛荚跈z測IL-6對雌激素受體陽性MCF-7細胞的增殖具有抑制作用。細胞接種于96孔板，密度5000細胞/孔，重復3孔,過夜,然后用無血清DMEM中替換培養基中豐富的IL-6。孵育96h后，通過倒置顯微鏡觀察細胞，細胞計數由CCK-8試劑盒測定。簡要來說就是，每孔加入10μl CCK-8溶液,然后37°C孵育1 - 4小時，取上清進行450 nm處......

1.固定：去除殘留液體，用1X PBST清洗接種在干凈玻片上的細胞3次，每次3min。在室溫下用新鮮配制的4%多聚甲醛固定15min。2.1XPBST漂洗三次：去除固定液，1XPBST漂洗3次，每次5min。3.透化：在1XPBST中加0.1% Triton X-100，孵育20分鐘以提高通透性。4.1XPBST漂洗三次：去除殘留液體，1XPBST漂洗3次，每次5min。5.封閉：去除殘留液體，在切片上加5% BSA或血清。確保血清與二抗來源于相同物種。然后在室溫下孵育20min。6.孵育一抗：去除殘留液體，用適當稀釋比例的一抗覆蓋組織部位，4oC過夜孵育。7.復溫：將切片從4oC移至室溫靜置約2......