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        • ELISA試劑盒精密度性能分析

          精密度,表示在相同條件下,同一樣本的重復測定值之間的符合程度,作為檢測系統的基本分析性能之一,是評判檢測系統有效性的評價基礎。那么,如何測定檢測ELISA試劑盒的精密度呢?ELISA試劑盒的精密度分為批內精密度和批間精密度。精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。。批內精密度:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值(Mean)及SD值。計算公式如下:批間精密度:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重......

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        • CRISPR/Cas9和Argonaute基因編輯技術簡介

          隨著科學技術的發展,人們對疾病認識的進一步深入,發現人類很多疾病的發病原因與基因突變有著密不可分的關系。那么如何去治療這些疾病呢?人們自然想到了采用一些技術手段對突變的基因序列進行重新編輯,以期達到治愈的目的,這項技術就是基因編輯技術?;蚓庉嫾夹g經過了以歸巢酶,ZFN,TALEN等以蛋白質與DNA識別與切割為原理的第一代基因編輯技術的發展,人們對基因編輯技術的認識不斷加深,但是由于第一代基因編輯技術操作步驟繁瑣、基因編輯效率低下、基因編輯脫靶現象嚴重等問題,很難應用于生產實踐。2003年,MIT小組首次利......

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        • 磁珠化學發光雙抗夾心酶免疫測定法檢測原理

          磁珠化學發光酶免疫測定,是集磁珠分離技術,靈敏的化學發光分析和特異的抗原抗體免疫測值與一體的檢測技術。其中磁珠化學發光雙抗夾心酶免疫測定法用酶標記抗體,代測標本中目的抗原,以及磁顆??贵w形成夾心結構,通過磁場把結合狀態(復合物:酶標記抗體+目的抗原+磁顆??贵w)和游離狀態的非目的物以及酶標記抗體分離開,加入發光底物進行發光反應,通過對發光強度的檢測進行定量或定性測定。此技術屬于酶免疫測定的一種。區別于酶聯免疫定量檢測試劑盒,最后一步酶反應所用的底物為發光劑,通過發光反應發出的光在特定的儀器上......

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        • ERK5信號通路

          前期專題我們介紹了MAPK級聯激活通路,主要包括細胞外信號調控的蛋白激酶(ERK)、c- Jun N端激酶(JNK)、P38MAPK以及ERK5 四條途徑,后3條均屬于應激激活MAPK通路,其中ERK5通路作為一種非典型的 MAPK 通路,它的發現是比較晚的,但是研究卻很活躍。ERK5 由 816 個氨基酸構成,長度幾乎是其他 MAPK 家族成員的 2 倍。ERK5 的N 末端包含有蛋白激酶區, C末端有一個獨特的 COOH,這有別于 MAPK 家族的其他成員,如圖1是ERK5的三維結構。ERK5 的級聯反應也是由 3 個相應順序激活: 各種刺激因素激活 MEKK2 /3,再由 MEKK2 /3激活MEK5......

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        • 酸性 α- 葡萄糖苷酶-龐貝病的診斷金標準

          酸性α- 葡萄糖苷酶 (Glucosidase Alpha, Acid, GaA),為淀粉水解酶類的一種。它能催化多糖水解,產生α- D-葡萄糖。同時它也具有轉糖苷作用,可將低聚糖中的α-1,4-糖苷鍵轉化成α-1,6-糖苷鍵或其他形式的鏈接,從而得到非發酵性的低聚異麥芽糖或糖酯、糖肽等。當位于第17號染色體上編碼酸性α-葡糖苷酶的基因突變,造成體內酸性α- 葡萄糖苷酶缺乏,糖原無法正常代謝,導致體內糖原在骨骼肌、心肌和平滑肌等肌肉組織內大量集聚,導致嚴重的神經肌肉病變。這種溶酶體貯積癥,被稱為龐貝病,也稱為酸性α -葡糖苷酶缺乏癥或II型糖原貯積......

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        • 補體C3在血清血漿中的檢測及應用

          補體(Complement)主要分布在人和動物的體液和細胞表面,活化后有生物活性,并可介導免疫和炎癥反應的一組蛋白質,又稱為補體系統。補體系統由近40種成分組成,大部分都是糖蛋白。補體的固有成分有13類,調節蛋白有10類;補體受體10多種。補體不耐熱,當溫度達到56度,時間達到30分鐘時大部分補體會失活。補體不易保存,冷凍干燥,保存時間相對長一些。補體第三組分(Complement Component 3,C3)是補體的核心成分,分子量為195000,由19號染色體C3基因編碼。C3是血液中含量最大的補體成分,主要由巨噬細胞和肝臟合成。C3在補體經......

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        • MAPK級聯激活信號通路

          絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是一組能被不同的細胞外刺激,如細胞因子、神經遞質、激素、細胞應激及細胞黏附等激活的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶。MAPK信號通路是利用逐級磷酸化過程將信號放大傳至細胞核內,調節轉錄因子的活性,調控相應基因的表達,進而引起細胞反應的一類重要信號系統。MAPK級聯激活是多種信號通路的中心,參與到細胞的分裂、分化、凋亡等多種生命過程,且在一些骨關節組織炎癥,癌細胞轉移等病癥中發揮關鍵性作用。MAPK信號轉導是以3 級激酶級聯激活的方式進行的,如圖所示,首先M......

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        • 各種組蛋白的體外檢測及提取技術

          組蛋白(histones)是真核細胞核中染色質中的強堿性蛋白質,是真核生物染色體的基本結構蛋白。組蛋白將DNA進行壓縮并與DNA一起形成核小體,如果沒有組蛋白,染色體DNA解開,形成散亂的很長的DNA鏈。組蛋白的研究具有非常重要的意義。體內組蛋白的異常會導致許多疾病,如慢性腎病等。同時有關組蛋白的修飾與機體免疫調節,自身免疫病,腫瘤,神經系統疾病,以及內分泌疾病都非常相關。組蛋白有六種類型:H1、H2A、H2B、H3、H4及古細菌組蛋白,它們富含帶正電荷的堿性氨基酸,而DNA中主要帶負電荷,二者相互作用,使DNA纏繞在組蛋白上......

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        色亚洲五月天
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