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        • 競爭抑制ELISA標準曲線的擬合方法

          眾所周知,對于具有多個表位的抗原而言,雙夾心 ELISA(Double Sandwich ELISA)可應用于目標抗原或抗體的定量檢測。而對于小分子抗原或半抗原,因缺 乏可作夾心法的兩個以上的結合位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定。此時, 可以采用競爭抑制法模式來檢測其中靶分子的含量。競爭抑制 ELISA 又叫封閉 ELISA,其主要原理是將標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。 標本中抗原量含量愈多,結合在固相上的酶標抗原愈少,最后的顯色也愈淺,也就 是說,最終顯色的結果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負相關。小分子激素......

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        • 蛋白質印跡常見問題及解決辦法

          蛋白質印跡(Western Blot)是根據抗原抗體特異性結合的原理檢測復雜樣本 中的某種蛋白的方法。將混合抗原樣本在凝膠板上進行單向或雙向電泳,經過 PAGE 分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白 質,且能保持電泳分離的類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽 作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與或標記的第二抗體起反應,經過底物顯 色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術廣泛應 用于鑒定蛋白以及對蛋白進行定性和半定量分析。蛋白質印跡分為蛋白質......

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        • Elisa常見樣本的處理方法

          Elisa 是一種快速、靈敏、準確可靠的一種定量分析方法,樣本的處理對于 Elisa 實驗的成功有著舉足輕重的作用。利用 ELISA 進行檢測的樣本類型包括常 見的血液(血清、血漿),組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清以及不常見的 皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、精 液、陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到 Elisa 實 驗的結果。下面我們就常見的樣本處理方法,供研究者參考。1、 血液樣本血液采取后應盡快進行處理,使血清(漿)從與血細胞接觸的全血中分離 出來。血清與......

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        • Elisa樣本測值低的原因

          ELISA 實驗中,實驗者經常會遇到樣本測值低的問題,樣本類型包括血清、 血漿、組織勻漿、細胞裂解液等。假設客戶的操作完全正確,標準曲線良好, 這種情況樣本測值低可從兩方面進行分析:一是樣本本身含量可被檢測,但由 于實驗操作等原因導致樣本測值不在試劑盒檢測范圍內;二是分析物在樣品中 本身濃度偏低。下面將從這兩個方面來進行分析導致樣本測值低的因素以及對 應的解決方案。1.樣本本身含量可以被檢測,有哪些原因導致測值低呢?1)試劑盒的保存試劑盒要按照規定的方法保存,實驗者在購買試劑盒時請務必留心試劑盒 不同組......

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        • 雙夾心法標準曲線的擬合方法

          自上世紀 70 年代問世以來,酶聯免疫吸附測定作為一種簡便、快速的微量 蛋白的定量測定方法,已廣泛應用于生物學和醫學的許多領域。酶聯免疫吸附測定(ELISA, Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)是將 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記結合的一種新型的免疫測定技術 。 其可分為以下四大類:直接 ELISA、間接 ELISA、夾心 ELISA 和競爭抑制 ELISA。 而其中,最廣泛用于目標抗原或抗體的定量檢測方法就是雙夾心 ELISA(Double Sandwich ELISA),其通過將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,通過待測 抗原與包被抗體反應......

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        • 轉化生長因子β-樣本前處理方案

          轉化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)屬于一組新近發現的調 節細胞生長和分化的 TGF-β超家族,廣泛存在于動物正常組織細胞核轉化細胞 中,具有促進胚胎發育、調節免疫、生長抑制、創傷修復、促進血管生成和細 胞外基質沉淀等功能。由于這種細胞因子可促使正常的成纖維細胞的表型發生 轉化,協同表皮生長因子,改變成纖維細胞貼壁生長特性,從貼壁依賴性生長 轉變為貼壁非依賴性生長的一類物質,故得以命名。哺乳動物中目前發現有 3 種 TGF-β,分別為 TGF-β1、TGF-β2 和 TGF-&be......

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        • TLR4——細菌LPS的受體

          Toll 樣受體 4(Toll-like receptor 4,TLR4)是由 Poltorak 等于 1998 年發現的 一種 I 型跨膜蛋白,其由 TLR4 基因編碼,并表達于包括單核細胞,巨嗜細胞在內 的多種組織細胞中,可以識別革蘭氏陰性細菌的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS), 并通過 NF-κB 或 JNK/SAPK 途徑啟動細胞內的信號轉導(圖 1)(對 LPS 及其檢 測產品的相關介紹請見 http://www.uscnk.com/topic/LPS-ELISA-Kit-may-Substitutefor-LAL-Test.html)。天然免疫(又稱固有免疫)是指生物在種系進化發育過程中逐漸形成的免疫方 式,它在個體出生時即......

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        • gABA的偶聯改造

          gABA(Gamma-Aminobutyric Acid)是哺乳動物中樞神經系統主要的抑制性 神經遞質,主要作用是通過神經系統減少神經元興奮性。gABA 在人體中可直接 調節肌肉緊張度及其他功能,當缺乏 gABA 時,人體會感覺焦慮和疲累,所以 gABA 的含量對人體的正常的生理機能起到重要的作用。gABA 是一種天然存在的非蛋白質氨基酸,在各個物種的分子量一樣, Cloud-Clone Corp.針對這一特點,開發了一系列偶聯載體的 gABA 分子以及針對 gABA 的特異性抗體和 gABA 的定量檢測試劑盒。gABA 產品的研制及面市,為 廣大科研人員提供了系統的 gABA 研究工......

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        色亚洲五月天
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